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一、简介

产奶对于婴儿的最佳喂养至关重要，对新生儿期的生长、发育和健康有直接影响 [ 1 ]。哺乳动物细胞具有复杂的自由基解毒反抗机制。抗氧化剂是清除自由基并防止由它们造成的损害的试剂。许多这些化合物是外源性的，是从食物中获得的。示例包括抗氧化剂，如 a-生育酚、B-胡萝卜素和抗坏血酸，以及一些微量营养元素，如锌和硒 [ 2 ]。氧化应激 (OS) 被认为是一种影响器官系统的代谢紊乱，它的存在不仅会影响动物的健康状况，还会影响最终产品（例如牛奶）的质量和数量 [ 3] 。有证据表明，在某些家养动物和实验室动物的哺乳期，氧化损伤会增加 [ 4 ]。大豆原产于朝鲜半岛和满洲地区，大豆一直是韩国食品中蛋白质的主要来源之一 [ 5 ] 。许多食品都是由大豆制成的，包括大酱（豆酱）、干酱（大豆来源）、清国酱（快速发酵豆酱）、豆腐、豆浆和豆腐渣 [6 ]。食用大豆可有效预防骨质疏松症、动脉硬化、中风和痴呆症，并可降低患癌症和肥胖症的风险 [ 5] 。因此，本研究旨在评估发酵大豆和维生素 C 补充剂对哺乳期白化大鼠脂质过氧化和抗氧化酶的影响。
2。材料和方法
2.1. 实验设计
2.1.1. 实验现场
该研究是在扎里亚艾哈迈杜贝洛大学医学院人体生理学系进行的。扎里亚。扎里亚海拔 670 米，距海 664 公里，位于几内亚北部稀树草原地区。扎里亚的平均降雨量约为 1000 毫米，主要集中在 3 月至 10 月期间。扎里亚的最高环境温度范围为 27˚C - 35˚C，有旱季和雨季。该实验是在炎热潮湿（雨季）（2011 年 6 月至 7 月）期间在扎里亚艾哈迈杜贝洛大学兽医生理学和药理学系（11˚10'N，07˚38'E）进行的海拔650米，位于尼日利亚北几内亚萨凡纳地带 [ 7 ] 。
2.1.2. 动物分类和药物管理局
I 组：（正常对照）口服正常的重要饲料颗粒和蒸馏水（1 ml/kg），II 组：甲氧氯普胺（5 mg/kg），III 组：100 mg/kg 维生素 C。三个（ 3) 第四组 (4) 下的子组分别接受 10%、20% 和 40% 大豆，第五组：与 20% 大豆补充剂和维生素 C (100 mg/kg) 共同给药。口服给药十 (10) 天。动物处理获得了扎里亚艾哈迈杜贝洛大学伦理委员会的伦理批准，符合标准动物福利指南，
2.2. 样品采集
在实验结束时，大鼠在密闭室中通过吸入氯仿进行麻醉，通过心脏穿刺获得的血样放入标本瓶中，使其凝结并使用 Centrifuge Hettich（Universal 32，Made在德国）在 23˚C 的平均室温下，获得的上清液用于生化测定。
2.3. 生化检测
2.3.1. 血清丙二醛测定
丙二醛 (MDA) 是脂质氢过氧化物分解的许多低分子量终产物之一，并且是最常测量的脂质过氧化指数。丙二醛 (MDA) 活性使用 NWLSS™ 丙二醛测定试剂盒（Northwest Life Sciences Specialies，Product NWK-MDA01，Vancouver WA，特异性：丙二醛，灵敏度：0.08 µ）根据 [8] 改编的方法进行评估。测试原理基于MDA与硫代巴比妥酸（TBA）的反应；形成在 532 nm 强烈吸收的 MDA-TBA2 加合物
2.3.2. 血清超氧化物歧化酶测定
使用 North West Life Science Specialties (NWLSS™) SOD 测定试剂盒（产品 NWK-SOD02，特异性：Cu/Zn、Mn 和 Fe 超氧化物歧化酶，灵敏度：5 U/mL）测定超氧化物酶歧化酶 (SOD) 活性。该方法基于最初由 [ 9 ] 描述的苏木精自动氧化速率的超氧化物抑制原理，并进行了修改以提高稳健性和可靠性。简而言之，将 920 μL 测定缓冲液添加到每个比色杯中。随后添加 40 μL 测定缓冲液（用于空白）和 40 μL 样品。将混合物温育两(2)分钟。加入40 μL苏木精试剂，快速混匀，开始自氧化反应。在 560 nm 下每 10 秒测量一次吸光度，持续 5 分钟。
2.3.3. 血清过氧化氢酶测定
过氧化氢酶 (CAT) 活性是根据 [10] 的方法估算的，并经过修改以提高稳健性和便利性. 原理是基于监测 H 2 O 2的消耗衬底在 240 nm。简言之，在干净的比色杯中，加入1000 μL样品稀释缓冲液，置于参比比色杯架中，分光光度计波长设置为240 nm。向干净的半微量 UV 比色皿中添加 950 μL 工作测定缓冲液。将 50 μL 稀释的标准品或样品移至比色杯中，并通过使用相同的移液器吸头重复移液（约 10 次）尽快混合。立即在 240 nm 处测量吸光度。
2.3.4. 血清谷胱甘肽过氧化物酶活性 (GPx) 测定
谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 活性使用 North West Life Science Specialties (NWLSS™) cGPx (GPX1) ELISA 试剂盒（产品 NWK-GPX02，特异性：谷胱甘肽过氧化物酶，灵敏度：12.5 pg/ml）根据作者描述的方法进行评估[ 11 ]。该测定基于夹心酶联免疫吸附测定，其中通过将 450 nm 吸光度样品孔与已知标准品的吸光度进行比较来确定样品 GPx 浓度。
2.4. 统计分析
所有数据均表示为平均值±平均值的标准误差（平均值±SEM）。使用单向方差分析 (ANOVA) 进行统计显着性，然后进行 Tukey 事后检验。所有统计分析均使用 SPSS 20.0 版软件和 Microsoft Excel (2007) 进行评估。P < 0.05 的值被认为是显着的。
3. 结果
3.1. 服用十 (10) 天大豆补充剂和维生素 C 对脂质过氧化生物标志物的影响；雌性哺乳期 Wistar 大鼠的丙二醛 (MDA) 水平
用大豆补充剂和维生素 C 治疗的雌性哺乳期 Wistar 大鼠的血清 MDA 如下：METCL（1.78 ± 0.15 vs 1.32 ± 0.11），VIT C（1.52 ± 0.09 vs 1.32 ± 0.11），SB 10%（1.42 ± 0.11 vs 1.42 ± 0.11 vs 1.32 ± 0.11）、SB 20%（1.60 ± 0.07 对 1.32 ± 0.11）、SB 40%（1.40 ± 0.05 对 1.32 ± 0.11）和 SB 20% + VIT C（1.40 ± 0.07 ± 1.32 ± 0.11）。与对照组相比，METCL (5 mg/kg) 治疗组有显着差异 (P < 0.05)。
3.2. 十 (10) 天大豆补充剂和维生素 C 对雌性哺乳期 Wistar 大鼠超氧化物歧化酶 (SOD) 水平的影响
用大豆补充剂和维生素 C 处理的雌性哺乳期 Wistar 大鼠的血清 SOD 如下：METCL（1.88 ± 0.07 对 2.24 ± 0.09），VIT C（2.08 ± 0.10 对 2.24 ± 0.09），SB 10%（1.74 ± 0.10 对2.24 ± 0.09)、SB 20%（1.84 ± 0.05 对比 2.24 ± 0.09）、SB 40%（2.30 ± 0.13 对比 2.24 ± 0.09）和 SB 20% + VIT C（1.96 ± 0.12 对比 2.24 ± 0.09）。与对照组相比，SB 10% 治疗组有显着差异（P < 0.05）。
3.3. 十 (10) 天服用大豆补充剂和维生素 C 对雌性哺乳期 Wistar 大鼠血清过氧化氢酶 (CAT) 水平的影响
用大豆补充剂和维生素 C 治疗的雌性哺乳期 Wistar 大鼠的血清 CAT 如下：METCL（46.20 ± 1.53 对 52.00 ± 0.71），VIT C（46.80 ± 1.59 对 52.00 ± 0.71），SB 10%（44.00 ± 1.14 对52.00 ± 0.71）、SB 20%（45.20 ± 1.28 对比 52.00 ± 0.71）、SB 40%（50.40 ± 1.17 对比 52.00 ± 0.71）和 SB 20% + VIT C（48.20 ± 1.02 对比 52.00 ± 0.71）。与对照组相比，METCL（5 mg/kg）、SB 10% 和 SB 20% 治疗组有显着差异（P < 0.05）。
3.4. 十 (10) 天大豆补充剂和维生素 C 对雌性哺乳期 Wistar 大鼠谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 水平的影响
用大豆补充剂和维生素 C 治疗的雌性哺乳期 Wistar 大鼠的血清 GPx 如下：METCL（44.20 ± 1.56 vs 48.40 ± 0.93），VIT C（42.60 ± 0.93 vs 48.40 ± 0.93），SB 10%（41.60 ± 1.50 vs 48.40 ± 0.93） 48.40 ± 0.93）、SB 20%（42.60 ± 1.50 对 48.40 ± 0.93）、SB 40%（48.00 ± 0.94 对 48.40 ± 0.93）和 SB 20% + VIT C（45.80 ± 0.86 对 48.40 ± 0.93）。VIT C、SB 10% 和 SB 20% 治疗组与对照组相比有显着差异（P < 0.05）。
4。讨论
表 1的本研究结果显示，与对照组相比，甲氧氯普胺治疗组的血清 MDA 水平显着增加。这一结果可能是由于甲氧氯普胺对肝细胞和其他易感细胞膜上的多不饱和脂肪酸的影响，导致脂质过氧化并随后形成副产物；丙二醛 (MDA)。与其他治疗组相比，用 20% SB 治疗的组显示血清 MDA 水平增加。这也可能是由于补充剂对氧化剂的可能促活性
± = 扫描电镜；与对照相比，列内带有上标 (*) 的平均值具有统计学意义 (P < 0.05)。
导致细胞脂质过氧化增加。这也可能是由于该浓度的补充剂无法有效打破脂质过氧化链反应。然而，与甲氧氯普胺处理的和对照相比，增加并不显着。超氧化物歧化酶（SOD）如表2所示, 显示甲氧氯普胺治疗组与对照组相比有所下降，尽管没有统计学意义。该结果可能是由于内源性抗氧化剂的耗尽，这是由于其用于对抗现有的氧化应激，如甲氧氯普胺治疗组中 MDA 水平升高所表明的那样。该结果也可能是由于甲氧氯普胺不能刺激内源性抗氧化剂的释放，以及它容易导致系统内活性氧 (ROS) 增加。然而，如表 2所示，维生素 C 治疗组的 SOD 水平显着增加，这可能是由于其抗氧化活性。然而，这种增加与 SB 40% 的增加相媲美，后者显示出血清 SOD 水平的最高增加。该结果表明 SB 40% 具有比标准抗氧化剂更高的抗氧化活性，或者可能比维生素 C 更持久。补充剂对血清 SOD 水平的这种抗氧化活性可归因于存在异黄酮。如表 2所示，在 10% 和 20% 处理组中，SB 和维生素 C 联合给药的结果比单独给予补充剂时 SOD 水平增加更多。这表明补充剂和维生素 C 的共同给药可能比单独使用 10% 和 20% 的较低剂量的补充剂更有效。在表 3, 在甲氧氯普胺中观察到的过氧化氢酶水平在统计学上有显着下降，补充治疗组为 10% 和 20%。该结果可能表明，与 40% 的补充剂的活性相比，甲氧氯普胺和 10% 和 20% 的补充剂无法特异性增加内源性过氧化氢酶的释放。表4显示谷胱甘肽过氧化物酶的结果。结果显示，在 10% 和 20% 的补充治疗组中，GPx 水平在统计学上显着下降，并且
± = 扫描电镜；与对照相比，列内带有上标 (*) 的平均值具有统计学意义 (P < 0.05)。
± = 扫描电镜；与对照相比，列内带有上标 (*) 的平均值具有统计学意义 (P < 0.05)。
± = 扫描电镜；与对照相比，列内带有上标 (*) 的平均值具有统计学意义 (P < 0.05)。
还有维生素c。这一结果表明，这些浓度的补充剂似乎也没有抗氧化活性，特别是在 GPx 释放或合成方面。
5.结论
总之，根据这项研究，5 mg/kg 的甲氧氯普胺增加了脂质过氧化，与对照组和其他治疗组相比，40% 的补充剂显示抗氧化能力增加。

利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
 

参考